吐温-20对Bt抗虫棉外源蛋白提取效率的影响

• 作者: 宋君 尹全 常丽娟 张富丽 敬媛 牛蓓 王东 罗苹 邓强
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 吐温-20 抗虫棉 外源蛋白 提取效率
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 植物保护·土壤肥料·土地规划
• 页码范围: 1777-1783
• 页数: 7页
• 分类号: S562
• 字数: 4621字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2017.8.014

摘要

[目的]探究吐温-20对转基因棉中Bt蛋白提取效率的影响程度,为转基因植物外源蛋白提取方法标准化,进而精准转Bt基因棉品种审定准入项目检测数据提供理论依据.[方法]配制7种不同吐温-20含量的提取液,提取抗虫棉GK19及非转基因棉泗棉3号苗期叶片、蕾期叶片和小蕾、铃期叶片和小铃中可溶性总蛋白,测定提取液中Bt蛋白和可溶性总蛋白含量,比较不同吐温-20含量提取液蛋白提取效率的差异.[结果]结果表明,吐温-20对抗虫棉中外源Bt蛋白提取效率有显著影响,蛋白提取缓冲液中吐温-20含量为0.55％是最适的.[结论]在蛋白提取缓冲液中加入适量吐温-20可明显提高抗虫棉外源Bt蛋白的提取效率,而不影响标准曲线R平方值(R2).过量添加吐温-20,超过一定的限度,检测变异系数加大,检测值可信度降低,检测结果无意义,因此准确控制蛋白提取缓冲液成分含量十分必要.