人IL-37b在大肠埃希菌中的表达、纯化及活性鉴定

• 作者: 徐大模 李梦媛 杨星九 韦荣飞 高苒
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IL-37b 表达 纯化 生物学活性
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R-33
• 字数: 4006字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.03.004

摘要

目的 表达重组IL-37b蛋白并去除内毒素,鉴定其活性.方法 构建原核表达载体pET28/IL-37b,转化大肠杆菌感受态细胞;经IPTG诱导表达的重组蛋白由Ni2+-NTA凝胶进行变性条件下的亲和层析纯化;用SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝染色鉴定重组蛋白是否为目的蛋白;去除蛋白中原核表达所产生的内毒素;将蛋白作用于受LPS刺激的RAW 264.7细胞,收集培养上清,通过ELISA方法检测IL-6的表达水平,鉴定蛋白的生物学活性.结果 表达了纯度较好的重组IL-37b蛋白,降低了其中原核表达所产生的内毒素,经鉴定其具备良好的生物学活性.结论 成功表达了具备良好生物学活性的IL-37b蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦荣飞	中国医学科学院医学实验动物研究所	7	7	2.0	2.0
2	李梦媛	中国医学科学院医学实验动物研究所	8	12	3.0	3.0
3	杨星九	中国医学科学院医学实验动物研究所	8	19	3.0	4.0
4	徐大模	中国医学科学院医学实验动物研究所	4	9	2.0	3.0
5	高苒	中国医学科学院医学实验动物研究所	8	37	3.0	6.0