猪传染性胃肠炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 何海建 吴媛 姜胜 孙静 宋厚辉 徐琦 李子祥 王晓杜 邵春艳
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪传染性胃肠炎 实时荧光定量PCR 特异性 敏感性
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 129-133
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.03.025

摘要

针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的保守序列设计引物,以TEGV疫苗毒株为模板,克隆S基因,并构建重组阳性质粒,优化反应体系和扩增条件,建立基于SYBR Green Ⅰ染料的实时荧光定量PCR检测方法,并对其特异性、重复性和灵敏度进行分析.结果显示:建立的检测方法灵敏度可达10拷贝/μL,标准曲线线性关系良好 (r=0.997),扩增效率高,具有良好的特异性和重复性.使用该方法对124份临床疑似TGEV病料进行检测,阳性样本有17份,检测样本的阳性率为13.7%.该方法可用于兽医临床上TGEV的快速检测和流行病学分析.