结核分枝杆菌抗原Rv0585c人T细胞抗原表位鉴定及其免疫原性评价

• 作者: 万康林 刘海灿 李雨晴 李马超 王雪枝 肖彤洋 蒋毅 陈杏
• 来源期刊: 中华流行病学杂志
• 关键词: 结核分枝杆菌 Rv0585c 人T细胞抗原表位 免疫原性 细胞因子
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 实验室研究
• 页码范围: 665-669
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-6450.2017.05.022

摘要

目的 研究结核分枝杆菌抗原Rv0585c的抗原表位及其免疫原性,为结核病特异免疫诊断技术和疫苗的研发提供基础.方法 利用生物信息学TE-predict和IEDB人T细胞抗原表位预测软件进行结核分枝杆菌抗原Rv0585c的人T细胞抗原表位预测,根据预测结果,合成表位多肽,用ELISpot试验检测预测表位在临床结核病患者中的免疫反应性.分别采用高、低剂量(100 μg/只和50 μg/只)的Rv0585c抗原表位多肽、同时以高、低剂量(50 μg/只和20 μg/只)的Ag85B蛋白抗原为对照,对随机分组的BALB/c小鼠进行免疫.利用ELISA方法检测IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的水平.结果 经生物信息学技术预测到Rv0585c 66个人T细胞抗原表位,选取合成了表位分布集中的抗原表位多肽9条.人群ELISpot试验筛选出3条阳性人T细胞表位多肽:P10110、P10112、P10117,用于肺结核检测的灵敏度分别为14.00％、12.00％和6.00％,特异度分别为100.00％、100.00％和97.96％;联合用于肺结核检测的灵敏度和特异度分别为22.00％和97.96％.动物免疫试验结果显示,P10110多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10,P10112多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2和IL-10,均高于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 Rv0585c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性,能刺激机体产生较强烈的细胞免疫应答,具有潜在的结核病细胞免疫诊断和新型结核疫苗的应用价值.