瘦素通过下调FBP1基因表达促进人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞增殖并抑制细胞凋亡

• 作者: 刘一锋 叶相森 张志乾 杨俊鸿 蒋玉林 陈婷梅 靳倩妮
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 瘦素 果糖-二磷酸酶 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 556-567
• 页数: 12页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2017.11.080

摘要

目的:探讨瘦素(leptin)对人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响,及其可能的分子作用机制.方法:应用瘦素(200 ng/mL)处理人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞后,分别采用CCK-8法和FCM法检测BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖及凋亡能力;蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白c-Myc和cyclin D1以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测经瘦素(200 ng/mL)处理后,BT-474和MDA-MB-231细胞内果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-bisphosphatase 1,FBP1) mRNA和蛋白表达水平的变化.然后,采用脂质体转染法,将携带有FBP1基因的重组质粒分别转染至BT-474和MDA-MB-231细胞中,随后行瘦素(200 ng/mL)处理,再应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测FBP1 mRNA及其蛋白的表达水平,以验证FBP1基因过表达的效果.采用CCK-8法再次检测BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖能力的变化,蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白c-Myc和cyclin D1表达水平的变化,FCM法检测细胞凋亡率的变化,并采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平的变化.结果:经瘦素(200 ng/mL)处理后,BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖能力明显增强(P值均＜ 0.01);增殖相关蛋白c-Myc和cyclin D1的表达水平明显升高(P值均＜ 0.01);同时,细胞凋亡率明显减少(P值均＜0.01);凋亡相关蛋白Bcl-2表达水平明显升高(P值均＜0.01),Bax表达水平明显降低(P值均＜0.01).2株细胞中FBP1 mRNA及蛋白的表达水平均较未用瘦素处理前明显下调(P值均＜ 0.05).FBP1过表达的BT-474和MDA-MB-231细胞经瘦素处理后,FBP1 mRNA及蛋白的表达水平均明显上调(P值均＜ 0.01),并抑制BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖能力,促进细胞的抗凋亡能力(P值均＜0.01).结论:瘦素可促进人乳腺癌BT-474和MDA-MB-231细胞的增殖并抑制2株细胞的凋亡,其机制可能与下调FBP1基因表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈婷梅		42	230	7.0	14.0
2	叶相森		2	0	0.0	0.0
3	蒋玉林		4	0	0.0	0.0
4	刘一锋		3	0	0.0	0.0
5	张志乾		3	0	0.0	0.0
6	杨俊鸿		3	0	0.0	0.0
7	靳倩妮		3	2	1.0	1.0