转基因耐除草剂玉米VCO-φ1981-5定性PCR标准检测方法的建立

• 作者: 夏启玉 李美英 杨小亮 肖苏生 贺萍萍 郭安平 郭静远
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: VCO-φ1981-5 定性PCR 灵敏度 品系特异性 标准化检测方法
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 2318-2325
• 页数: 8页
• 分类号: S19
• 字数: 5057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.12.019

摘要

转基因耐除草剂玉米VCO-φ1981-5是由加拿大Genective SA公司通过农杆菌侵染幼胚转化获得的1种新的抗草甘膦除草剂转基因玉米转化体,目前已经进行商业化生产应用.本研究的目的是建立转基因VCO-φ1981-5玉米品系特异性转化事件标准化定性PCR (polymerase chain reaction,PCR)检测方法.根据VCO-φ1981-5玉米插入的外源基因和左、右侧翼序列设计了一系列特异性的PCR引物,分别进行了引物筛选和PCR反应体系优化,建立了耐除草剂玉米VCO-φ1981-5转化体特异性定性PCR标准化检测方法,对建立的检测方法在非转基因VCO-φ1981-5玉米的混合样品中进行了特异性测试,仅从含有VCO-φ1981-5玉米样品中扩增到目的条带,表明检测方法具有很好的特异性,检测的灵敏度为0.1％.建立的检测方法经过实验室内和实验间循环验证比对,具有良好的重复性和再现性.本研究建立的VCO-φ1981-5玉米定性PCR标准化方法适用于产品中含有VCO-φ1981-5玉米转基因成分的检测.