改进的四引物扩增受阻突变体系PCR方法同时检测叶酸代谢过程相关的四个单核苷酸多态性位点的研究

• 作者: 冯志山 张益 李贵霞 段素霞 王乐 赵梦川 马学军
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 关键词: 叶酸 代谢 多态性,单核苷酸 聚合酶链反应 电泳,毛细管 DNA突变分析 DNA引物
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 799-804
• 页数: 6页
• 字数: 4171字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2017.10.013

摘要

目的 建立改进的四引物扩增受阻突变体系PCR(T-ARMS-PCR)检测方法,实现单管一次性检测叶酸代谢过程相关的4个单核苷酸多态性(SNP)位点:rs1801133,rs1801131,rs1805087和rs1801394.方法 方法学建立.于2017年1至4月在河北省儿童医院检验科收集150名体检儿童抗凝全血标本以待验证.利用T-ARMS-PCR原理及多重嵌合引物策略设计rs1801133、rs1801131、rs1805087及rs1801394的特异性内外嵌合引物.通过优化引物浓度和反应条件,经单管PCR反应,结合QIAxcel毛细管电泳分析扩增产物长度,判读150份标本的SNP基因型,同时所有标本经测序法进一步验证.利用SPSS 17.0统计软件卡方检验对150份标本的4个SNP位点分别进行哈迪-温伯格遗传平衡(HWE)检测.结果 改进的T-ARMS-PCR结合毛细管电泳分析的方法可在3 h内一次性识别本研究中叶酸代谢过程相关的4个SNP位点的8个不同等位基因,可对150份全血标本的SNP位点准确分型,其分型结果与测序法完全相符.4个SNP位点基因型的分布均符合HWE平衡定律(χ2rs1801133=0.69,Prs1801133=0.40; χ2rs1801131=0.21, Prs1801131=0.64; χ2rs1805087=3.32, Prs1805087=0.07;χ2rs1801394=1.91,Prs1801394=0.17).结论 本研究建立的改进的T-ARMS-PCR结合毛细管电泳分析方法,可准确地同时检测叶酸代谢过程相关的4个SNP位点,为指导人群特异性地补充叶酸提供了一种可能的技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李贵霞	河北省儿童医院检验科	60	350	10.0	15.0
2	马学军	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	40	227	8.0	14.0
3	段素霞	河北医科大学研究生学院	3	10	2.0	3.0
4	赵梦川		1	1	1.0	1.0
5	王乐		1	1	1.0	1.0
6	冯志山		1	1	1.0	1.0
7	张益	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	4	13	2.0	3.0