CT26细胞分泌的BMPs对小鼠树突状细胞和巨噬细胞表面PD-L1表达的影响

• 作者: 杜驰 王喻义 罗锋 赵茂媛
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 树突状细胞 巨噬细胞 PD-L1 BMPs
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 33-40
• 语种: 中文

摘要

目的 观察小鼠结肠癌CT26细胞培养上清中骨形成蛋白(BMPs)对树突状细胞(DCs)和巨噬细胞表面程序性死亡分子配体 1 (programmed death-ligand 1,PD-L1)表达的影响,探讨其对免疫的调控.方法 体内实验:将皮下接种和腹腔接种CT26肠癌细胞的BALB/c荷瘤小鼠随机分为对照组、BMPs抑制剂LDN193189组和LDN193189联合紫杉醇组,肿瘤接种第8天,分组给药18 d.测量肿瘤体积和腹围,流式细胞术分别检测其瘤体或腹水中DCs和巨噬细胞百分比及其表面PD-L1阳性表达率.体外实验:对正常BalB/c小鼠骨髓分离培养的树突状细胞(BMDCs)和巨噬细胞(BMMs)分别做以下处理:①不作处理(对照组);②加入CT26上清;③与CT26不接触共培养;④加入CT26上清联合LDN193189;⑤与CT26不接触共培养,加入LDN193189;⑥加入CT26上清联合LDN193189和紫杉醇;⑦与CT26不接触共培养,加入LDN193189和紫杉醇.ELISA检测CT26培养上清中是否有BMPs的表达,流式细胞术检测不同处理下BMDCs和BMMs表面的PD-L1表达阳性率,RT-PCR和Western blot检测干扰素调节因子1(IRF-1)mRNA和蛋白的表达.结果 体内实验中,LDN193189组肿瘤体积或腹围最大,DCs和巨噬细胞百分比及其表面PD-L1阳性表达率最低;体外实验中,ELISA检测结果显示,BMPs在CT26上清中有表达,其质量浓度为(0.59±0.09) ng/mL.加入CT26上清联合LDN193189和与CT26不接触共培养并且加入LDN193189组BMDCs和BMMs表面的PD-L1表达阳性率较低,接近对照组水平.RT-PCR和Western blot检测结果显示,对照组BMDCs、BMMs中IRF-1 mRNA和蛋白表达低于与CT26不接触共培养或加入CT26上清组;LDN193189加入到加有CT26上清或与CT26共培养的BMDCs和BMMs中,IRF-1 mRNA和蛋白表达下降;而两个LDN193189联合紫杉醇组,IRF-1 mRNA和蛋白表达均增加.结论 CT26分泌的BMPs增强树突状细胞和巨噬细胞表面PD-L1的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗锋	四川大学华西医院肺癌中心生物治疗国家重点实验室	40	112	7.0	9.0
2	王喻义	四川大学华西医院肺癌中心生物治疗国家重点实验室	4	4	2.0	2.0
3	赵茂媛	四川大学华西医院肺癌中心生物治疗国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
4	杜驰	四川大学华西医院肺癌中心生物治疗国家重点实验室	1	2	1.0	1.0