miR-181a对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响

• 作者: 严云勤 佟慧丽 朱新峰 朱月 李树峰 郝卫杰
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: microRNA-181a(miR-181a) 牛 骨骼肌卫星细胞 靶基因HOX-A11 分化
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 19-24,28,289
• 页数: 8页
• 分类号: S823
• 语种: 中文

摘要

为了探讨miR-181a对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响,试验将分离培养的牛骨骼肌卫星细胞接种在6孔板中,待细胞汇合度为70％时,用PEI转染miR-181a的模拟物miR-181a-M、抑制剂miR-181a-I、模拟物对照miR-181a-M-NC和抑制剂对照miR-181a-I-NC进入牛骨骼肌卫星细胞中,在0,1,2,3天用Western-blot检测肌肉有关分化蛋白MyoD、MyoG和MYH3以及靶基因HOX-A11蛋白的表达量,用免疫荧光法检测细胞肌管的数量.结果表明:在牛骨骼肌卫星细胞中,转染miR-181a模拟物的牛骨骼肌卫星细胞,有关肌肉分化蛋白质如MyoD、MyoG和MYH3的表达量明显增加,细胞肌管数量显著增多,进一步证实miR-181a促进细胞的分化.在双荧光素酶报告系统中,miRNA-181a和HOX-A11基因的3’-UTR结合时荧光素酶活性明显下降,miRNA-181a和突变的3’-UTR结合时荧光素酶活性没有下降.说明HOX-A11是miR-181a的靶基因,miR-181a对牛骨骼肌卫星细胞的分化具有促进作用.