乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因突变是导致病毒耐药的基础[1-3],虽然测序技术已广泛应用于HBV耐药突变检测[4],但其较低的灵敏度大大限制了其临床应用价值[5-6];反向杂交的灵敏度较高,约为5%,但其价格较贵,操作不够简便,尤其在发展中国家无法全面推广;一些新的技术,如质谱分析、超深度测序和高通量测序[7]等技术逐渐得以应用,但是这些技术存在价格昂贵、操作繁琐、数据分析工作量大、存在碱基错配等缺点,较适合于研究目的,不太适合于临床应用.为了克服以上方法的缺点,建立高灵敏度、简便、价廉和实用的HBV耐药突变检测方法,本研究建立了低变性温度共扩增PCR(coamplification at lower denaturation temperature polymerase chain reaction,COLD-PCR)法[8-9]并联合Sanger测序技术,将其应用于HBV已知和未知的耐药突变检测.