重组Ser17突变型 hIFN-β腺病毒的构建及其对结肠癌细胞的增殖抑制作用

• 作者: 句红萍 唐丽媛 李楠 李臣 王元 王波 童毅 缪希松 芮丹云 谢力
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Ser17 hIFN-β 结肠癌 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 196-200,205
• 页数: 6页
• 分类号: R730.54
• 字数: 4776字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2017.02.007

摘要

目的：：构建表达突变型人源β干扰素( Ser17 hIFN-β)的重组腺病毒,体外评价其对结肠癌细胞的抑制增殖作用及细胞周期的影响。方法：人工合成含Ser17突变型hIFN-β基因并克隆至穿梭载体pshuttle-CMV,pshuttle-Ser17 hIFNβ与腺病毒骨架质粒pAd同源重组后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒rAd-Ser17 hIFNβ。 rAd-Ser17 hIFNβ转染人结肠癌细胞株HT-29,Western blot检测rAd-Ser17 hIFNβ在HT-29中的表达；MTT细胞生长实验检测rAd-Ser17 hIFNβ对HT-29细胞的体外增殖的影响,流式细胞术检测 HT-29细胞周期改变情况。结果：重组腺病毒经 HEK293细胞扩增后滴度可达109.125 CCID50/ml；Western blot检测到外源性Ser17 hIFN-β基因在HT-29细胞中的表达；rAd-Ser17 hIFNβ转染后 HT-29细胞生长受到抑制( P<0.05),细胞处于S期百分比增加。结论：表达Ser17突变型hIFN-β的重组腺病毒能抑制结肠癌细胞的增殖及诱导S期阻滞,为应用β干扰素对结肠癌进行基因治疗提供了实验基础。