FuGENE(R) 6 Transfection Reagent及 pEGFP-N1-HSF1转染JEG-3细胞条件的优化

• 作者: 刘亭 刘香香 吴琼 杨友辉 薛维娜 陈一飞
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克转录因子 氧化应激 绿色荧光蛋白 人绒毛膜癌细胞 转染 DNA延滞实验 质粒 FuGENE
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1384-1388
• 页数: 5页
• 分类号: R-33|R363
• 字数: 3475字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2017.12.005

摘要

目的:优化FuGENE(R)6 Transfection Reagent (FuGENE)转染质粒pEGFP-N1-HSF1到人绒毛膜癌细胞JEG-3的条件.方法:利用DNA延滞实验考察pEGFP-N1-HSF1质粒与FuGENE试剂的结合力,用不同剂量的FuGENE试剂和质粒转染JEG-3细胞,通过倒置荧光显微镜和血球计数法计算其转染效率,筛选出最佳的转染条件并进行转染,通过qRT-PCR检测HSF1 mRNA的水平.结果:DNA延滞实验显示FuGENE和pEGFP-N1-HSF1质粒具有较高的结合力,当质粒量一定时,随着FuGENE量的增加,其转染效率先增加后降低;当FuGENE和质粒比例为2∶1(μL∶μg)时,转染效率最高,达(39.05±1.19)％;当固定转染比例时,随着转染剂量的增加,其转染效率先增加后降低,当转染剂量为250 μL时,转染效率最高,达(42.98±2.56)％;qRT-PCR结果显示,转染组HSF1 mRNA的水平较对照组有显著上调.结论:在转染比例为2∶1,转染剂量为250 μL时,对JEG-3细胞有最佳的转染效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴琼	贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室	12	24	4.0	4.0
2	杨友辉	贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室	4	0	0.0	0.0
3	薛维娜	贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室	21	42	4.0	6.0
4	刘亭	贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室	19	15	3.0	3.0
5	陈一飞		5	3	1.0	1.0
9	刘香香	贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室	3	4	1.0	2.0