pEGFP-N1-TNFα表达载体的构建与鉴定

• 作者: 任艳鑫 孙瑞梅 李晓江 杨洁 王虎 赵留芳 隋军
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 肿瘤坏死因子 真核表达载体 质粒pEGFP-N1 基因疗法 CIK细胞
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 263-266
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pEGFP-Nl-TNFα重组质粒并鉴定,为转导CIK细胞并定位表达奠定基础.方法 以pMD19 Simple T-TNFα为模板,PCR扩增TNFα CDS区片段,将PCR产物进行15 g/L琼脂糖凝胶电泳,并回收TNFα条带,用BglⅡ和HindⅢ将TNFa的PCR片段及目的载体pEGFP-N1双酶切,然后进行连接.连接产物转化至DH5α中.挑取克隆,提质粒,进行鉴定.结果 PCR扩增片段、双酶切出现722 bp大小的目的基因条带与预期结果相符；插入片断测序结果与合成的寡核苷酸序列一致.结论 成功构建了重组质粒pEGFP-N1-TNFα,为下一步用纳米材料转染CIK细胞的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓江	昆明医科大学第三附属医院头颈肿瘤研究中心	20	49	5.0	5.0
2	杨洁	昆明医科大学第三附属医院头颈肿瘤研究中心	32	92	5.0	9.0
3	任艳鑫	昆明医科大学第三附属医院头颈肿瘤研究中心	15	39	4.0	5.0
4	赵留芳	昆明医科大学第三附属医院头颈肿瘤研究中心	8	13	2.0	3.0
5	孙瑞梅	昆明医科大学第三附属医院头颈肿瘤研究中心	8	23	3.0	4.0
6	王虎	昆明医科大学第三附属医院头颈肿瘤研究中心	2	1	1.0	1.0