Caveolin-1基因PEGFP-N1真核表达载体的构建及表达

• 作者: 张姗妮 潘灵辉
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: caveolin-1 PEGFP-N1载体 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 392-394
• 页数: 3页
• 分类号: R737.31
• 字数: 2815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2009.03.022

摘要

目的:克隆caveolin-1(CAV1)基因开放阅读框的cDNA序列,构建PEGFP-N1/CAV1的真核表达载体.方法:设计并合成带酶切位点及保护碱基的引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,PEGFP-N1载体及caveolin-1基因片段进行限制性双酶切,电泳后回收切开的PEGFP-N1 及caveolin-1片段,经连接反应后构建PEGFP-N1/CAV1真核表达载体.结果:PEGFP-N1/CAV1重组质粒经PCR电泳结果显示,得到一条在555 bp的片段;重组质粒经限制性内酶切双酶切电泳结果证实,可释放一条在555 bp的片段和4.8 kbp的载体片段;重组质粒测序结果,经BLAST比对,100%符合;瞬时转染宫颈癌Hela细胞48 h荧光显微镜及实时荧光定量PCR证实重组质粒在宫颈癌Hela中得到表达.结论:成功构建了同时携带有绿色荧光蛋白及G418筛选位点的PEGFP-N1/CAV1真核表达载体复合体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘灵辉	广西医科大学附属肿瘤医院麻醉科	107	553	12.0	17.0
2	张姗妮	广西医科大学附属肿瘤医院麻醉科	5	9	2.0	2.0