基于分子克隆方法制备标准分子量片段混合物

• 作者: 王乐 王超群 王邦义 裴雪 赵兴春 陈曼 马温华
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医物证学 分子克隆 荧光接头 标准分子量片段 毛细管电泳
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 245-248
• 页数: 4页
• 分类号: DF795.2
• 字数: 2097字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13618/j.issn.1001-5728.2017.03.004

摘要

目的 制备标准分子量DNA片段混合物.方法 选取pMD18-T载体部分序列作为插入片段,设计引物,制备包含不同大小的标准分子量片段的克隆.大量培养细菌提取质粒,用双酶切、连接荧光接头的方法制备不同大小的带有荧光的标准分子量片段,混合,纯化,最终获得标准分子量片段混合物(内标).结果 用分子克隆方法制备出具有实用性的标准分子量片段混合物,其单个标准分子量片段大小分别为80bp、124bp、194bp、224bp、254bp、304bp、349bp、399bp、424bp、454bp.并且这些标准分子量片段混合物可以准确地对DNATyper15试剂盒的扩增产物进行检测.结论 应用该方法制备了能满足研究和实验室要求的标准分子量片段混合物,为DNA分子量标准物标准品的制作提供了一种新的方法.