山羊早期胎儿组织TET1与Wnt通路基因的表达变化及其相关性

• 作者: 安炳星 张艳丽 罗南剑 谭强 赵永聚 陈秋羊
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 山羊胎儿 TET1 Wnt通路基因 表达变化 相关性
• 年，卷（期）: 2017,（14）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 2816-2825
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2017.14.017

摘要

[目的]通过检测TET1和Wnt信号通路相关基因以及DKK家族基因在山羊胎儿发育早期的表达变化,分析TET1与Wnt通路基因的相关性,为TET1调控山羊胎儿发育研究提供理论依据.[方法]选取12只健康大足黑山羊母羊,自然发情后与同一只种公羊自然交配.采用剖腹产手术的方法,分别获得妊娠20、25、30、60和90d的胎儿,对胎儿的生长指标(体重、体长)进行统计,并采集了60和90d胎儿的组织器官样品(心、肝、肺、肾、脑、皮肤),通过Real-time PCR (RT-PCR)检测各样品中TET1基因,DKK家族基因(DKK1、DKK2、DKK3)和Wnt家族基因(Wnt2、Wnt2b、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt7b、Wnt16)的相对表达量.利用SPSS软件分析山羊胎儿发育早期不同阶段TET1与WNT信号通路相关基因相关性以及基因表达显著性(P＜0.05).[结果]山羊妊娠早期胎儿生长在60d后有显著变化.荧光定量检测结果表明,TET1基因表达随妊娠天数的增加呈上升趋势.Wnt家族基因在山羊胎儿发育中都检测到表达(Wnt2,-2b,一4,-5a,-5b,-7b,-16).其中,Wnt2和Wnt7b表达量随胎儿发育逐渐增高;Wnt2b、Wnt5a、Wnt5b、Wnt7b在妊娠30d时有显著高表达(P＜0.05);Wnt4在胎儿发育20d时表达显著(P＜0.05);Wnt16基因在妊娠25 d有显著高表达(P＜0.05).DKK家族基因表达检测结果显示,DKK1在胎儿发育早期阶段都有表达,DKK2/3在妊娠初期表达量较低,后期表达增高.通过组织中基因表达检测显示,TET1在90d胎儿肝、肺、肾和脑中的表达水平相比于60d胎儿组织升高,肝中表达量显著(P＜ 0.05).Wnt家族基因Wnt2在组织器官中有相对活跃的表达,妊娠90d胎儿肺中表达量极显著(P＜0.01);Wnt16基因在胎儿皮肤组织中表达显著(P＜0.05),且维持在一个较高的水平;Wnt5a和Wnt7b在肾中表达显著(P＜0.05),其他Wnt基因在组织中都有表达.相关性分析显示,胎儿生长指标(体重、体长)变化与TET1的表达呈极显著正相关(P＜0.01);TET1在胎儿发育早期的表达与Wnt2、Wnt7b、Wnt16呈现正相关,与Wnt2b、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b呈负相关,其中与Wnt5b呈显著负相关(P＜0.05),与Wnt7b呈极显著正相关(P＜0.01).Wnt通路基因之间也有相互关系,Wnt2与Wnt4呈极显著负相关(P＜ 0.01).Wnt2与Wnt7b,Wnt2b与Wnt5a、Wnt5b,Wnt5a与Wnt5b呈极显著正相关(P＜0.01). Wnt4与Wnt5a呈显著正相关(P＜0.05).[结论]获得了TET1与Wnt基因在山羊胎儿发育早期的表达模式,并进行了相关性分析,填补了这些基因在山羊方面的研究空白;TET1与Wnt基因对山羊胎儿早期的发育和组织的形成是一个动态的调控变化过程;TET1基因表达与部分Wnt基因呈现显著正相关,部分呈现显著负相关;Wnt通路基因之间表达量呈现一定的相关性.这些数据为TET1与Wnt分子调控山羊早期胎儿发育的机制深入研究提供了参考.