鸡3种主要DNA病毒多重感染复合PCR检测方法的建立

• 作者: 刘媛 李学伍 杨继飞 柴书军 王丽 赵东 邓瑞广
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 马立克氏病病毒 传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 DNA病毒 复合PCR
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 101-105
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4252字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.07.018

摘要

依据GenBank中注册的鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡痘病毒(FPV)基因组核苷酸序列中的保守序列设计引物,3种病毒各设计3对引物,共计9对引物,经生物学软件筛选后,得到3对相互匹配较佳的引物.3对匹配引物经单一PCR验证后,优化复合PCR反应条件,确定最佳的退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶浓度;经特异性、敏感性试验及简化PCR试验,建立简易复合PCR检测方法.复合PCR扩增出的3条带大小与预期一致,即228 bp(MDV)、400 bp (ILTV)、499 bp (FPV);建立的复合PCR方法能同时检测出100 fg MDV、ILTV、FPV的DNA.同时依据PCR技术原理,将经典的三温热循环改进为二温热循环试验,即将退火和延伸合并为一步(62℃),缩短了反应时间.建立的3种病毒的复合PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可以用于临床病料的快速诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李学伍	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	30	344	9.0	18.0
2	邓瑞广	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	63	543	11.0	20.0
3	赵东	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	10	68	6.0	8.0
4	刘媛	河南科技大学动物科技学院	9	10	2.0	3.0
5	王丽	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	8	20	3.0	4.0
6	杨继飞	河南省农业科学院动物免疫学重点实验室	10	72	5.0	8.0