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摘要:
目的 探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)激活剂双丁酰环腺苷酸(dual dibutyryl cyclic AMP,dbcAMP)调控蛋白激酶Wee1B蛋白对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,为进一步研究母源性因子Wee1B在早期胚胎发育过程中的作用提供理论基础.方法 将2 mmol/L dbcAMP作用于小鼠1-细胞期受精卵1 h,并显微注射Wee1B-mRNAs,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、Wee1B-WT/KD注射组、Wee1B-S15A/D注射组,继续在M16培养基中培养.相差显微镜下观察小鼠受精卵的形态变化和卵裂情况,放射自显影测定各期细胞有丝分裂促进因子(MPF)活性,Western blotting方法 检测Wee1B蛋白的表达、CDC2-pTyr15和Wee1B-pSer15的磷酸化水平.结果 小鼠受精卵在有dbcAMP存在时,G1、S、G2和M各细胞周期均检测到磷酸化的Wee1B表达,非磷酸化条带在G2期和M期才能检测到;各组受精卵卵裂出现时间延迟,卵裂率显著降低;hCG注射后35 h内,MPF活性一直处于低水平,CDC2-pTyr15磷酸化状态和MPF活性变化趋势相一致.结论 dbcAMP激活PKA后,PKA磷酸化Wee1B蛋白的S15位点,Wee1B活性增加,阻滞受精卵分裂,本研究提示Wee1B蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点,可以更好地认识早期胚胎发育的分子事件.
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文献信息
篇名 双丁酰环腺苷酸通过蛋白激酶Wee1B调控小鼠1-细胞期受精卵的发育研究
来源期刊 中国现代医生 学科 生物学
关键词 Wee1B 双丁酰环腺苷酸 蛋白激酶A 有丝分裂促进因子 小鼠受精卵
年,卷(期) 2017,(22) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 34-38,169
页数 6页 分类号 Q954.4
字数 3684字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘超 锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室 29 89 6.0 7.0
2 刘乙蒙 锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室 13 27 4.0 4.0
3 肖建英 锦州医科大学教务处 28 123 7.0 10.0
4 任丽莉 锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室 11 29 3.0 5.0
5 张苧兮 锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室 1 0 0.0 0.0
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Wee1B
双丁酰环腺苷酸
蛋白激酶A
有丝分裂促进因子
小鼠受精卵
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11-5603/R
大16开
北京市朝阳区东四环中路78号楼(大成国际中心B座)708-3室
80-611
2007
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