梅毒螺旋体膜蛋白Tp0971经TLR2/NF-κB诱导巨噬细胞分泌细胞因子

• 作者: 刘良专 吴移谋 张跃军 蒋传好 蒋最明 顾敏
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 梅毒螺旋体 膜蛋白 细胞因子 Toll样受体2
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 668-672
• 页数: 5页
• 分类号: R377
• 字数: 3858字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2017.05.007

摘要

目的:探讨梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白Tp0971诱导巨噬细胞分泌细胞因子的分子机制.方法:以Tp Nichols株基因组为模板,PCR扩增Tp0971基因并构建重组质粒pET28a(+)/Tp0971,随后将其转化至表达宿主菌E.coli Rosseta中,IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和层析柱纯化重组蛋白.经去除Tp0971重组蛋白中的内毒素后,将其刺激巨噬细胞,ELISA检测细胞因子IL-8、IL-1β和IL-6的分泌水平.并采用Toll样受体2(TLR2)中和抗体或TLR2 siRNA,以及核转录因子κB(NF-κB)抑制剂PDTC处理细胞,观察TLR2和NF-κB在介导细胞因子分泌中的作用.结果:成功构建pET28a(+)/Tp0791原核表达载体,并表达出一相对分子量为29 kD的重组蛋白.ELISA结果显示,0.5~10 μg/ml Tp0791能以剂量依赖性方式诱导巨噬细胞分泌IL-8、IL-1β和IL-6.采用siRNA沉默TLR2表达,或用TLR2中和抗体封闭后,IL-8、IL-1β和IL-6分泌明显减少.此外,Tp0791也能增加细胞核中NF-κB p65的表达水平,采用NF-κB抑制剂PDTC处理后,细胞因子分泌水平也显著降低.结论:Tp0971经TLR2/NF-κB可诱导巨噬细胞分泌细胞因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴移谋	南华大学病原生物学研究所	243	1097	14.0	22.0
2	蒋最明	湖南省株洲市中心医院临床检验中心	11	77	5.0	8.0
3	顾敏	湖南省株洲市中心医院临床检验中心	26	137	6.0	10.0
4	刘良专	南华大学病原生物学研究所	27	103	6.0	9.0
5	张跃军	湖南省株洲市中心医院临床检验中心	4	55	4.0	4.0
6	蒋传好	南华大学病原生物学研究所	10	29	4.0	4.0