PAl-1对气道平滑肌增殖和ERK表达的影响

• 作者: 于晨希 刘文静 朱洁晨 朱述阳 王亮
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 纤溶酶原激活物抑制物-1 细胞外调节蛋白激酶 气道平滑肌细胞 哮喘
• 年，卷（期）: 2017,（26）
• 所属期刊栏目: 基础研究·论著
• 页码范围: 18-24
• 页数: 7页
• 分类号: R562.25
• 字数: 4964字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2017.26.004

摘要

目的 探讨纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)对气道平滑肌增殖的调控作用,以及对细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达的影响.方法 体外培养小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)并分为7组:空白对照组、PAI-15μg/L组、PAI-110 μg/L组、PAI-120 μg/L组、PAI-140μg/L组、PAI-180μg/L组、PAI-1 100 μg/L组.放入37℃培养箱分别培养12、24和48 h,采用CCK-8检测ASMCs的A值,计算增殖率.以增殖率最高的实验组的浓度和作用时间作为PAI-1作用最适浓度和最适作用时间,进一步分6组:A组(空白对照);B组(PAI-1 20μg/L);C组(PAI-1 40 μg/L);D组(PAI-1 80 μg/L);E组(PAI-1 100 μg/L);F组(PAI-1最适浓度+ERK通道抑制剂PD98059 10 μmol/L),用CCK-8检测ASMCs的增殖,Western blot检测ERK蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链反应检测ERK mRNA的表达.结果 5～100μg/L PAI-1作用ASMCs 12、24和48 h后细胞增殖率结果显示,在相同浓度下,不同时间各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),以48 h时ASMCs增殖率最高;在相同时间下,不同浓度各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),80 μg/L PAI-1的ASMCs增殖率最高;故选取48 h为最适作用时间,80μg/L为最适浓度进行后续实验.再次分组的实验结果表明,B、C、D、E组的ERK磷酸化水平和ERK mRNA的相对表达量与A组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),B、C、D、E组增高;B、C、D、E组两两比较结果显示,除B组与E组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)外,其余各组两两比较,差异有统计学意义(P＜0.05),当PAI-1浓度波动于20～80μg/L时,ERK磷酸化水平和ERK mRNA相对表达量随浓度升高而增高,＞80μg/L后则不再增高;加入PD98059的F组与D组比较,差异有统计学意义(P ＜0.05),ERK磷酸化水平和ERK mRNA表达降低.结论 外源性PAI-1可以通过促进ERK通路的表达,进而促进ASMCs的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王亮	徐州医科大学附属医院呼吸内科	3	4	1.0	2.0
2	朱述阳	徐州医科大学附属医院呼吸内科	38	61	5.0	6.0
3	朱洁晨	徐州医科大学附属医院呼吸内科	16	10	2.0	3.0
4	刘文静	徐州医科大学附属医院呼吸内科	7	4	2.0	2.0
5	于晨希	徐州医科大学附属医院呼吸内科	2	4	1.0	2.0