摘要:
目的 研究葛根素注射液对H2O2诱导海马神经元损伤的保护作用及其潜在机制.方法 将细胞随机分成4组:空白组(细胞未处理组),阴性对照组(100 mg·L-1葛根素),阳性对照组(40 lμ,mol·L-1 H2 O2)和实验组(100mg·L-1葛根素+ 40 μmol·L-H2O2).通过MTT法确立H2O2诱导海马神经元损伤模型的最佳条件.显微镜观察细胞形态变化,用MTT法测定神经元活性.以生化法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(HP)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)的水平,以实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因Bd-2和Bax的表达.结果 阳性对照组的H2O2最佳处理条件为40 mol·L-1处理1h,细胞存活率为(69.67±4.93)%.实验组中葛根素最佳浓度为100mg·L-1.与空白组(100%)相比,阳性对照组的HP、SOD和GSH分别为(56±4.58)%,(60.33±6.11)%,(51±7)%,均显著降低;而MDA、ROS分别为(152.33±6.03)%,(149.67±10.79)%,显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.01).与阳性对照组比较,实验组的HP、SOD和GSH分别为(88.67 ±4.73)%,(89.33 ±4.51)%,(90.33±3.21)%,显著升高;而MDA、ROS分别为(108.00±4.58)%,(111.00±8.32)%,显著降低,差异均有统计学意义(均P <0.01).与空白组相比,阳性对照组的Bcl-2 mRNA表达为0.37±0.06,明显下降;而Bax mRNA表达为2.64±0.46,明显升高.与阳性对照组相比,实验组的Bcl-2mRNA、Bax mRNA的表达水平分别为0.75±0.08,1.44±0.08,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 葛根素可能通过调节Bax和Bcl-2基因的表达水平对H2 O2所致海马神经元的损伤起到保护作用.