靶向Atg5的siRNAs促进肝癌细胞HCC-LM3失巢凋亡的实验研究

• 作者: 王志毅 罗敏 胡鹏 蔺朝妮 邓欢
• 来源期刊: 现代医药卫生
• 关键词: 肝细胞癌 失巢凋亡 自噬 自噬相关基因5 小干扰RNA
• 年，卷（期）: 2017,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2273-2276
• 页数: 4页
• 字数: 3772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5519.2017.15.011

摘要

目的 研究靶向自噬相关基因5(Atg5)的小干扰RNA(siRNAs)能否诱导肝癌细胞的失巢凋亡,探讨细胞自噬是否参与肝癌细胞的失巢凋亡抵抗.方法 选择高、 低转移潜能的肝癌细胞HCC-LM3、SMMC-7721及人胚肝细胞LO2,采用流式细胞术检测细胞在失巢培养状态下的凋亡率,采用蛋白质印迹(Western blotting)检测细胞Atg5蛋白表达.针对Atg5的siRNAs,采用脂质体转染法转染至高转移潜能的HCC-LM3肝癌细胞,利用Western blotting检测Atg5蛋白表达变化.在失巢状态下培养转染Atg5 siRNAs的肝癌细胞HCC-LM3,流式细胞术检测肝癌细胞的失巢凋亡率,Western blotting检测肝癌细胞中自噬小体膜蛋白LC3Ⅰ、Ⅱ型蛋白表达转变验证细胞自噬水平的变化.结果 失巢培养后,HCC-LM3、SMMC-7721细胞失巢凋亡率明显低于人胚肝细胞LO2,差异均有统计学意义(P<0.05);而在两组肿瘤细胞中,HCC-LM3细胞的失巢凋亡率低于SMMC-7721细胞,差异有统计学意义(P<0.05).失巢培养后,HCC-LM3及SMMC-7721细胞LC3Ⅱ型蛋白表达均较LO2细胞明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).转染Atg5 siRNA1和siRNA2的肝癌HCC-LM3细胞中,Atg5蛋白的表达均明显低于阴性对照HCC-LM3-NC,差异均有统计学意义(P<0.05).细胞中LC3Ⅱ型蛋白表达较阴性对照HCC-LM3-NC细胞明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).失巢凋亡率较阴性对照HCC-LM3-NC细胞明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 靶向Atg5的siRNAs能抑制肝癌细胞Atg5蛋白表达,并通过下调自噬水平来诱导肝癌细胞的失巢凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡鹏	重庆医科大学附属第二医院感染科	61	218	9.0	12.0
2	王志毅	重庆医科大学附属第二医院感染科	31	336	10.0	17.0
3	邓欢	重庆医科大学附属第二医院感染科	3	5	2.0	2.0
4	罗敏	重庆医科大学附属第二医院感染科	12	24	3.0	4.0
5	蔺朝妮	重庆市东南医院内二科	1	2	1.0	1.0