摘要:
目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对不同HPV亚型宫颈癌细胞增殖和miRNA表达的调控作用.方法 通过对宫颈癌细胞HeLa (HPV16/18+)、SiHa (HPV16+)、CaSki (HPV16+)和C33A(HPV-)加入EGCG后24 h及48 h,MTr法检测EGCG对细胞增殖的抑制作用及其时间浓度依赖性,并用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测has-miR-210、has-miR-29、hsa-miR-203和has-miR-125 b在不同宫颈癌细胞中的表达.结果 100 μg/ml、80 μg/ml、60 μg/ml、40 μg/ml、20 μg/ml、10 μg/ml、0μg/ml 7个药物梯度浓度的EGCG与对照组比较,HeLa细胞生长明显减慢,差异有统计学意义(t=10.347 9,P<0.05),且随着EGCG浓度的增加及处理时间的延长,抑制作用不断增强,有效抑制HeLa细胞的生长,且呈时间(t=8.250 7,P<0.01)与浓度依赖性(t=16.349 4,P<0.01),差异有统计学意义,24 h、48 h的半数抑制浓度IC50分别为90.74 μg/ml、72.74 μg/ml.C33A细胞株中,不同浓度的EGCG明显下调了has-miR-203 (t=8.361 1,P<0.01)及has-miR-125 b(t=10.553 9,P<0.01)的相对表达量,差异有统计学意义;对has-miR-210、has-miR-29的调控作用不确定.HeLa细胞株中has-miR-125 b被上调,差异有统计学意义(t=11.867 6,P<0.01);对has-miR-210、has-miR-29、has-miR-203作用不确定.CaSki细胞株,上调了has-miR-210 (t=14.812 9,P<0.01)、has-miR-29(t=14.257 2,P<0.01)、has-miR-125 b(t=15.357 5,P<0.01),差异有统计学意义;对has-miR-203的调控作用不确定.SiHa细胞株,has-miR-125 b(t=16.219 7,P<0.01)及has-miR-203被上调(t=13.030 3,P<0.01),差异有统计学意义;对has-miR-210、has-miR-29的调控作用不确定.结论 EGCG对抑制宫颈癌细胞的增殖起重要作用,并能通过直接影响miRNA表达抑制宫颈癌细胞增殖,可能是其发挥抑制宫颈癌细胞增殖的机制之一.