miR-200b-3p与DNA甲基转移酶-3a在骨关节炎软骨 细胞中的表达及作用机制

• 作者: 商安全 李冬 王微微 胡丽庆 陆文英
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨关节炎 软骨细胞 miR-200b-3p DNA甲基转移酶-3a
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 临床实验研究
• 页码范围: 617-623
• 页数: 7页
• 分类号: R446.6
• 字数: 5734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2018.08.14

摘要

目的 探讨miR-200b-3p靶向DNMT3A对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响.方法 RT-PCR法检测miR-200b-3p,DNMT3A,MMPs和COLⅡ在正常软骨组织和骨关节炎软骨组织中的表达;采用双荧光素酶和western bolt验证miR-200b-3p和DNMT3A之间的靶向关系;构建过表达的miR-200b-3p和DNMT3A真核细胞载体;qRT-PCR和western bolt检测MMPs和COLⅡmRNA及蛋白质在稳定转染的软骨细胞中的表达;通过细胞活力测定(MTS法)、团块培养、Hoechst 33342染色法评估细胞的增殖与凋亡情况.结果 qRT-PCR法及westernbolt结果显示,miR-200b-3p和COLⅡ在骨关节炎软骨组织中呈低表达,而DNMT3A和MMPs呈高表达;双荧光素酶和western bolt证实miR-200b-3p和DNMT3A之间存在靶向关系;MTS法、团块培养及Hoechst 33342染色法结果证实,在miR-200b-3p过表达的软骨细胞中,DNMT3A和MMPs的表达水平明显下调,COLⅡ的表达水平则明显上调,且细胞的生存能力增强,凋亡率降低(P均<0.05);在过表达DNMT3A的软骨细胞中,MMPs的表达水平明显上调,COLⅡ的表达水平明显下调,且细胞的生存能力减弱,凋亡率增加(P均<0.05).结论 miR-200b-3p可以抑制MMPs分泌和促进COLⅡ合成,并且可以通过抑制DNMT3A的表达来增强骨关节炎软骨细胞的生长与增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李冬	同济大学附属同济医院检验科	70	229	8.0	11.0
2	王微微	盐城市第六人民医院检验医学科	13	17	2.0	3.0
3	商安全	同济大学附属同济医院检验科	13	17	2.0	3.0
7	陆文英	盐城市第六人民医院检验医学科	6	6	2.0	2.0
8	胡丽庆	宁波市第一人民医院检验科	27	190	8.0	13.0