表达Strep-tag的重组H5N6亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的建立

• 作者: 周圆一 徐帅 曾巧英 汪亮 王正祥
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H5N6亚型 Strep-tag
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 15-21
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4300字
• 语种: 中文

摘要

为构建携带Strep标签的禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)A/Goose/Hunan/109/2014(H5N6,HN109)反向遗传操作系统,RT-PCR扩增AIV HN109株8个基因片段,分别连接至pBD双向转录表达载体.通过点突变技术将NS1基因的77~84位的氨基酸替换成Strep-tag.将8个重组质粒共转染293T细胞,48 h后收取细胞上清接种至9~11日龄SPF鸡胚,并检测血凝效价.结果显示,本研究成功拯救病毒株rHN109-NS1-Strep.rHN109-NS1-Strep的8个基因片段序列与亲本毒素 HN109株一致;rHN109-NS1-Strep与亲本毒HN109株在MDCK细胞上复制水平相似,在小鼠体内病毒复制能力相似.结果表明,本研究已成功构建携带Strep-tag的H5N6亚型禽流感病毒反向遗传操作系统,为研究该病毒的分子致病机理、传播机制及新型疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾巧英		33	326	6.0	18.0
2	徐帅	中国农业科学院兰州兽医研究所	7	2	1.0	1.0
3	周圆一		1	0	0.0	0.0
7	王正祥	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0
8	汪亮	中国农业科学院兰州兽医研究所	3	0	0.0	0.0