摘要:
目的 探讨氯喹(chloroquine,CQ)联合顺铂(cisplatin,DDP)对人非小细胞肺癌细胞A549增殖抑制及细胞凋亡的影响,以及两药联合影响肺癌细胞增殖的相关机制.方法 不同浓度CQ(5,10,20,40,80μmol/L)或DDP(2,4,8,16,32μmol/L)单药作用于非小细胞肺癌A549细胞及20μmol/L的CQ和不同浓度的DDP(2,4,8,16,32μmol/L)联合作用于A549细胞,药物处理24,48,72 h后,用MTT法检测药物对细胞增殖抑制的影响;PI单染流式细胞术检测CQ组(20μmol/L),DDP组(8μmol/L),DDP(8μmol/L)与CQ(20μmol/L)联用组处理A549细胞24 h细胞的凋亡情况;DAPI染色检测CQ、DDP单用以及联合用药后A549细胞核的变化;Western blot检测CQ、DDP单用以及联合用药对Mcl-1、Bcl-2、Bax等凋亡相关蛋白表达的影响.结果 不同浓度CQ(5,10,20,40,80μmol/L)或DDP(2,4,8,16,32μmol/L)对细胞增殖均具有抑制作用,且CQ(20μmol/L)与DDP(2,4,8,16,32μmol/L)二者联合处理24 h后肺癌A549细胞存活率分别为(97.71±2.47)%,(91.77±3.17)%,(87.36±3.70)%,(77.19±2.07)%,(58.99±4.71)%,显著低于相应浓度的DDP组(P<0.05).20μmol/L CQ与8μmol/L DDP联合处理24 h诱导肺癌细胞A549的凋亡率为(35.8±4.19)%,显著高于空白对照组和CQ、DDP单独给药组(P<0.05).DAPI染色结果显示CQ+DDP组细胞表现为细胞核皱缩浓集,呈现亮蓝色荧光,或细胞核呈分叶、碎片状;CQ联合DDP导致细胞中抑制凋亡蛋白Mcl-1、Bcl-2表达水平明显下调,同时促凋亡蛋白Bax表达水平增强.结论 CQ能增强DDP对人非小细胞肺癌细胞A549的增殖抑制作用,且能增强DDP诱导肺癌细胞的凋亡,其机制可能与下调抑制凋亡蛋白Mcl-1、Bcl-2的表达有关.