高危型人乳头瘤病毒HPV18E6和E7基因的克隆与表达

• 作者: 何红鹏 刘翔 姚佳宏 来永巍 王艳春 范红艳
• 来源期刊: 中国研究型医院
• 关键词: HPV18 E6、E7 基因克隆 质粒构建 基因表达
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 23-28
• 页数: 6页
• 字数: 3803字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19450/j.cnki.jcrh.2018.04.006

摘要

目的:HPV18 E6和E7是两个病毒癌基因,存在于宫颈癌HeLa细胞中.采用双酶切和同源重组两种不同的策略克隆HPV18 E6、HPV18 E7和HPV18 E6-E7串联表达质粒,研究两者在细胞癌变中的作用.方法:首先,从HeLa细胞中提取RNA,RT-PCR获取E6和E7编码序列,分别用双酶切连接法或同源重组的方法连入不同载体质粒.然后,从HeLa细胞中提取DNA,PCR法扩增E6-E7编码序列,酶切连接法构建重组表达质粒.结果:经测序正确的质粒转染HeLa细胞,使用RT-PCR法或者Western-blot法检测目的基因转录与表达均显著升高.结论:HPV18 E6、E7和E6-E7三个表达质粒构建成功,均可在HeLa细胞中正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范红艳		39	121	6.0	10.0
2	王艳春		55	98	4.0	8.0
3	来永巍		11	12	2.0	3.0
4	何红鹏	天津科技大学生物工程学院	5	1	1.0	1.0
5	刘翔	天津科技大学生物工程学院	4	8	1.0	2.0
6	姚佳宏		1	0	0.0	0.0