海参铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及活性鉴定

• 作者: 丛丽娜 张齐 李学一 李成 牛庆昌 穆贤 车明月
• 来源期刊: 大连工业大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 仿刺参 铜锌超氧化物歧化酶 反转录PCR 抗氧化活性
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 食品与生物工程
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: TS254|Q786
• 字数: 1992字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2018.0102

摘要

采用原核宿主大肠杆菌BL21(DE3)成功表达了具有活性的仿刺参铜锌超氧化物歧化酶(A pos-tichopus japonicus Cu/Zn-superoxide dismutase,Aj-SOD1)蛋白.利用Trizol法从海参肠组织中提取总RNA,通过反转录PCR扩增获得Aj-SOD1基因的编码序列(GenBank:JX097096.1,459 bp),构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1;在目的基因两端引入(XhoⅠ/N deⅠ)酶切位点,构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1(XhoⅠ/N deⅠ).将此载体与表达质粒pET30a(+)分别双酶切后连接,构建重组表达载体pET30a-Aj-SOD1.转化至大肠杆菌BL21(DE3),Kan+抗性筛选阳性转化子,获得基因工程菌BL21(DE3)-pET30a-Aj-SOD1.SDS-PAGE和邻苯三酚自氧化法检测发现,经0.1mmol/L IPTG诱导8h后,成功获得具有抗氧化活性的Aj-SOD1蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丛丽娜	大连工业大学生物工程学院	57	255	8.0	14.0
2	李成	大连工业大学生物工程学院	22	36	4.0	5.0
3	穆贤	大连工业大学生物工程学院	2	2	1.0	1.0
4	牛庆昌	大连工业大学生物工程学院	4	2	1.0	1.0
5	车明月	大连工业大学生物工程学院	2	3	1.0	1.0
6	张齐	大连工业大学生物工程学院	4	3	1.0	1.0
7	李学一	大连工业大学生物工程学院	1	2	1.0	1.0