RIPK4低表达影响骨肉瘤细胞增殖与丝裂原活化蛋白激酶信号通路的研究

• 作者: 刘华 屈涛 杨成伟 王世勇
• 来源期刊: 华南国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤MG-63 受体相互作用蛋白激酶4 丝裂原活化蛋白激酶通路
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 149-152,168
• 页数: 5页
• 分类号: R738.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13730/j.issn.1009-2595.2018.03.002

摘要

目的 探讨受体相互作用蛋白激酶4 (receptor interacting protein kinase 4,RIPK4)低表达抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号通路异常的相关性研究.方法脂质体转染法将RIPK4-siRNA转入骨肉瘤MG-63细胞;四甲基偶氮唑盐(methylt hiazolyldiphenyl-tet razolium bromide,MTT)实验检测骨肉瘤MG-63细胞增殖情况;免疫荧光实验检测RIPK4 siRNA低表达对MAPK表达分布的影响;蛋白质印迹实验检测骨肉瘤MG-63细胞中RIPK4-siRNA对MAPK信号通路的影响.结果 MTT结果表明,和空白组比较,RIPK4-siRNA转染组48 h时细胞生存率明显较低(P＜0.05).免疫荧光实验显示,RIPK4低表达后,RIPK4-siRNA转染组细胞中,MAPK主要分布在细胞核,且总体表达减少.蛋白质免疫印迹法结果显示,RIPK4-siRNA转染MG-63细胞后,RIPK4蛋白水平明显下调,同时,MAPK在细胞胞浆的表达减少,而在细胞胞核的表达分布增多.灰度值分析表明,和空白组比较,RIPK4-siRNA转染组MAPK下游的因子细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)、p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)、核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的灰度值明显降低(P＜0.05).结论 在MG-63细胞中,RIPK4的低表达影响MAPK激酶的分布及表达,RIPK4的低表达对MG-63细胞增殖抑制可能和MAPK/ERK/p38/JNK/NF-κB信号通路异常有关.