小麦黄花叶病毒单克隆抗体的制备及ACP-ELISA检测方法的建立

• 作者: 任春梅 杨柳 程兆榜 缪倩
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦黄花叶病毒 单克隆抗体 ACP-ELISA
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 34-40
• 页数: 7页
• 分类号: S435.121
• 字数: 5553字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2018.01.005

摘要

为建立简便、有效、低成本小麦黄花叶病毒(WYMV)的检测方法,用提纯的WYMV免疫BALB/c小鼠后,利用杂交瘤细胞技术经细胞融合、筛选和克隆,共获得2D4、2D3和6F43株能稳定传代并分泌抗WYMV单克隆抗体的杂交瘤细胞,并分别注射小鼠腹腔制备其单抗腹水.3株单抗腹水的间接 ELISA 效价为10-6~10-7,抗体类型及亚类均为IgG1、κ链.特异性检测结果表明6F4和2D4这2株单抗仅与WYMV的32 kD外壳蛋白有特异性免疫反应.利用效价最高的2D4单抗建立了检测WYMV的抗原包被ELISA方法(ACP-ELISA),其灵敏度分析结果表明,当病叶以1 : 25600 (g/ml)倍稀释时仍能检测到病毒,特异性分析结果表明可有效区分小麦易感染的中国小麦花叶病毒(CWMV).田间样品检测结果表明该方法可准确、可靠地用于小麦WYMV的大规模检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程兆榜	江苏省农业科学院植物保护研究所	76	1073	20.0	29.0
2	任春梅	江苏省农业科学院植物保护研究所	27	246	10.0	14.0
3	缪倩	江苏省农业科学院植物保护研究所	12	77	6.0	8.0
4	杨柳	江苏省农业科学院植物保护研究所	6	14	2.0	3.0