蝴蝶兰2种病毒的同步检测及其CP融合反义表达载体构建

• 作者: 崔波 张燕 梁芳 许申平 邓祖丽颖
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蝴蝶兰 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 外壳蛋白基因 融合反义基因
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 植物保护·土壤肥料
• 页码范围: 1622-1627
• 页数: 6页
• 分类号: Q949.71
• 字数: 4274字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2018.8.012

摘要

[目的]建兰花叶病毒(CyMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)是侵染蝴蝶兰最主要的2种病毒,给蝴蝶兰产业造成巨大经济损失.本文建立了快速检测这2种病毒的方法,并为培育同时抗CyMV和ORSV的蝴蝶兰新品种奠定基础.[方法]根据2种病毒CP基因序列设计了2对特异性引物,运用RT-PCR方法同时检测这2种病毒,利用反义RNA技术构建2种病毒CP基因的融合表达载体.[结果]利用设计的特异性引物检测12株蝴蝶兰样品,有25％同时检测出2种病毒,在同一PCR反应体系中,扩增出2个目的条带清晰无杂带.从感病蝴蝶兰叶片总RNA中克隆出CyMV CP基因的125 bp片段和ORSV CP基因的164 bp片段.将CyMV的CP基因片段以3’→5’方向与表达载体pCAMBIA1300连接,命名为pCAMBIA1300-CyMV,经酶切及菌落PCR鉴定可获得125 bp的小片段;再将ORSV的CP基因片段以3’→5’方向与pCAMBIA1300-CyMV连接,命名pCAMBIA1300-CyMV-ORSV,经酶切及菌落PCR鉴定可获得289 bp的片段.[结论]所设计的2对特异性引物能够在同一PCR体系中快速高效地检测出CyMV和ORSV,含2种病毒CP基因的反义融合表达载体构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔波	郑州师范学院生物工程研究所	93	393	10.0	13.0
2	邓祖丽颖		22	84	6.0	8.0
3	许申平	郑州师范学院生物工程研究所	26	67	5.0	7.0
4	张燕	郑州师范学院生物工程研究所	18	24	3.0	4.0
5	梁芳	郑州师范学院生物工程研究所	36	129	7.0	9.0