摘要:
目的 观察富硒黄芪皂苷对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导退变的大鼠软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响,探讨其作用机制.方法 细胞分为对照组、模型组和实验组.对照组不给予药物处理,用10 ng·mL-1的IL-1β建立体外退变软骨细胞作为模型组和实验组,实验组给予25~300 mmol·L-1富硒黄芪皂苷干预.用噻唑蓝(MTT)法观察软骨细胞的增殖情况,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察软骨细胞DKK1、WISP1、Wnt1、β-catenin和LRP5基因表达,用Western blot法观察软骨细胞DKK1、WISP1、Wnt1、β-catenin和LRP5蛋白表达.结果 对照组、模型组和100 mmol·L-1实验组的DKK1基因的表达分别为1.00±0.00,0.37±0.24,0.79±0.26;WISP1分别为1.00 ±0.00,3.13±0.33,1.35 ±0.40;Wnt1分别为1.00 ±0.00,2.01±0.07,1.45±0.33;β-catenin分别为1.00±0.00,2.38±0.30,1.32±0.17;LRP5分别为1.00±0.00,1.70±0.17,1.25±0.23.DKK1蛋白灰度值分别为0.52±0.03,0.22±0.02,0.36±0.07;WISP1分别为0.23±0.04,0.58±0.09,0.29±0.03;Wnt1分别为1.33±0.06,2.78±0.15,1.54±0.17;β-catenin分别为0.47±0.02,0.80±0.05,0.50±0.03;LRP5分别为0.87±0.13,1.31±0.16,0.66±0.03.各浓度富硒黄芪在24,48,72 h增殖能力都增强,但只有100mmol·L-1实验组在48 h差异最显著,且100 mmol·L-1实验组WISP1、Wnt1、β-catenin、LRP5基因和蛋白表达均降低,DKK1的基因和蛋白表达均升高(P<0.05).结论 富硒黄芪可显著增强软骨细胞的增殖活性,这种作用与Wnt/β-catenin信号通路密切相关.