玉蜀黍黑粉菌环介导等温扩增检测体系的建立及应用

• 作者: 曹言勇 李会勇 段丽萍 石磊 陈洵
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 玉蜀黍黑粉菌 环介导等温扩增(LAMP) qPCR
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 482-491
• 页数: 10页
• 分类号: S432.44
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000179

摘要

本文根据玉蜀黍黑粉菌(Ustilago maydis)的UmP ep1、UmPit2和UmSee1基因各设计4套环介导等温扩增(LAMP)引物,从中筛选出1套引物对LAMP反应体系进行3因素(Bst DNA聚合酶浓度、Mg2+浓度、内外引物浓度比)3水平的优化试验.并对优化的U.maydis LAMP反应体系进行特异性、灵敏度及田间检测可行性试验.特异性试验表明,该方法能特异性检测U.maydis,而与其他病原菌的DNA没有交叉反应;灵敏度试验表明,该反应体系的最低检出限为44fg·μL-1pEasy-Pep质粒DNA,制作的标准曲线可对U.maydis进行定量分析.该方法也适用于在U.maydis侵染前或侵染早期对田间样品进行检测,对现场采集的172份田间样品进行检测,其中140个样品显示为阳性.本研究所建立的LAMP体系具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,并能在45 min内完成对田间样品的检测,是快速、定量检测U.maydis的有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹言勇		10	39	4.0	6.0
2	李会勇		20	152	7.0	12.0
3	段丽萍		1	0	0.0	0.0
4	陈洵		1	0	0.0	0.0
5	石磊		2	0	0.0	0.0