目的 以绿色荧光蛋白(GFP)标记的鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.Typhi)为研究对象,秀丽隐杆线虫为模式生物,初步探究体内环境下HilD对ssrAB表达的调控作用.方法 通过基因工程技术分别构建携带gfp基因的亲本株S.Typhi(ssrAB-gfp+ pc DNA3.1)、hilD基因缺失株S.Typhi(ΔhilD+ ssrAB-gfp+pc DNA3.1)和hilD基因回补株S.Typhi(△hilD+ ssrAB-gfp+pcDNA3.1-hilD)标记菌.利用荧光显微技术,观察3株标记菌在饲喂感染秀丽隐杆线虫体内外的GFP表达状况及其定殖分布,并通过ImegJ软件进行荧光强度的比较.结果 成功构建的3株标记菌在秀丽隐杆线虫体内外均呈现绿色荧光,荧光强度为S.Typhi(ssrAB-gfp+ pc DNA3.1)高于S.Typhi(ΔhilD+ ssrAB-gfp+pc DNA3.1-hilD)和S.Typhi (ΔhilD+ ssr AB-gfp+ pc DNA3.1),S.Typhi(ΔhilD+ ssrAB-gfp+ pc DNA3.1-hilD)高于S.Typhi(ΔhilD+ ssrAB-gfp+ pcDNA3.1);3株标记菌在线虫体内主要定殖分布于口咽部和肠道中,荧光强度为口咽部较肠道高.结论 GFP在鼠伤寒沙门氏菌中得到稳定表达,感染秀丽隐杆线虫后同样获得GFP的稳定表达,且在线虫的口咽部和肠道具有良好的定殖分布,首次初步证明体内环境下HilD介导ssrAB表达,但并非为单一的调控作用.