日本血吸虫成虫抗原通过ROS诱导人LX?2肝星状细胞NLRP3炎症小体活化和胶原表达

• 作者: 刘劲峰 朱燕楠 王伟 王勇 缪婷婷 陆忠奎
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 关键词: LX?2细胞 SWA NLRP3炎症小体 ROS 肝纤维化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 71-79
• 页数: 9页
• 字数: 5931字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005?0507.2018.02.002

摘要

为了探讨日本血吸虫成虫抗原(SWA)对LX?2细胞NLRP3炎症小体活化和纤维化相关基因表达的影响,以及活性氧(ROS)在其中的作用,本文首先采用不同浓度(0、25、50、100μg/mL)的SWA刺激LX?2细胞,通过实时荧光定量PCR(Real?time PCR)和Western blot检测细胞中NLRP3、Caspase?1、IL?1β、 α?SMA和ColⅠ的基因和蛋白表达,ELISA检测细胞IL?1β 的分泌水平;同时使用CCK?8(Cell Counting Kit?8)法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞LDH的释放;流式细胞术检测SWA刺激对LX?2细胞中ROS产生的影响;之后使用ROS清除剂N?乙酰半胱氨酸(N?acetylcysteine,NAC)处理细胞,检测NLRP3、IL?1β、Caspase?1、 α?SMA、ColⅠ基因和蛋白的表达水平.结果显示,当SWA的浓度达100μg/mL时,LX?2细胞内NLRP3、Caspase?1、IL?1β、 α?SMA和ColⅠ的mRNA的表达与对照组相比均明显升高,同时相关蛋白的表达和IL?1β的分泌也显著升高.流式检测结果显示,SWA刺激LX?2细胞后能显著增加细胞内ROS的生成,并在NAC处理后,可见明显抑制细胞内ColⅠ和炎症小体活化相关的基因和蛋白的表达.结果提示,SWA可以诱导LX?2细胞内炎症小体活化和胶原表达,并且ROS反应可能在介导NLRP3活化中发挥重要的作用.