不同温度糖氧剥夺对人神经母细胞瘤细胞表达小泛素样修饰蛋白化相关蛋白的影响

• 作者: 刘晋萍 吕若宁 童媛媛
• 来源期刊: 中国体外循环杂志
• 关键词: 体外循环 深低温停循环 脑保护 低温
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 41-47
• 页数: 7页
• 字数: 4542字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13498/j.cnki.chin.j.ecc.2018.01.11

摘要

目的 观察缺血缺氧状态下不同低温对人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)表达小泛素样修饰蛋白(SUMO)化相关蛋白的影响,探讨SUMO化在深低温停循环(DHCA)过程中对人神经系统的保护作用.方法 在18℃、26℃、30℃、37℃环境中进行4 h缺氧的细胞与正常培养细胞对比,观察细胞缺氧后形态,微板法检测再灌注24 h后培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平,WestemBlot检测缺氧后UBC9、SUMO1、SUMO2/3水平及再灌注24 h后caspase-3水平,qPCR检测缺氧后UBC9的mRNA表达情况.结果 LDH检测结果示,糖氧剥夺(OGD)4h使LDH漏出量显著增加,低温可减少LDH漏出(P＜0.05,n = 6). Western Blot结果显示,与37℃ OGD组相比,低温干预可上调结合态SUMO1表达,温度越低表达量越高,18℃组明显高于30℃组(P＜0.05,n = 6),但18℃组与26℃组差异无统计学意义(P＞0.05,n=6);低温干预可同时上调结合态及游离态SUMO2/3表达(P＜0.05,n = 6),但与37℃ OGD组相比,并不额外增加SUMO2/3蛋白结合游离比(P ＞0.05,n = 6);OGD和低温对UBC9蛋白表达影响均不显著(P＞0.05,n = 6);OGD损伤4h再灌注24h后Caspase-3蛋白水平明显上调,低温干预下调Caspase-3表达(P＜0.05,n = 6).qPCR结果显示,OGD和低温对UBC9蛋白表达影响均不显著(P＞0.05,n = 3).结论 细胞遭受缺血缺氧时,低温可增加SUMO蛋白整体表达水平,提高SUMO1蛋白结合能力,提高神经细胞抗缺血缺氧耐受能力.短时间缺血缺氧情况下,26℃和30℃的神经保护作用与18℃深低温效果相近.