山东省副猪嗜血杆菌分子流行病学调查及其外膜蛋白P2基因的表达纯化

• 作者: 丛晓燕 于江 任素芳 吴家强 孙文博 曾昊 李建达 杨杰 郭立辉 陈智
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 流行病学 ompP2基因 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 40-47
• 页数: 8页
• 分类号: S852.612
• 字数: 4255字
• 语种: 中文

摘要

根据副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)外膜蛋白(outer membrane proteins,Omp)P2基因序列(GenBank登录号:FJ685754.1)设计引物,对2015～2016年在山东省不同地区采集的225份病料进行PCR扩增和遗传演化分析,结果发现2015年和2016年Hps检出阳性率分别为7.63％、7.48％,细菌分离确定225份样品中17份为阳性;Hps菌株之间的氨基酸同源性在86.7％～99.7％,同源性较高的蛋白具有交叉反应性.构建Hps ompP2基因原核表达载体,确定OmpP2蛋白的最佳诱导温度,通过亲和层析Ni-IDA树脂纯化,获得高纯度的OmpP2蛋白,Western blot确定纯化的OmpP2蛋白与不同血清型的Hps阳性血清均存在良好的反应原性.本研究为进一步探索Hps OmpP2的生物学特性及对副猪嗜血杆菌病的血清学诊断、亚单位疫苗的开发奠定了基础.