miR-429对CRKL表达的靶向调控作用研究

• 作者: 刘淑清 孙明忠 郭春梅
• 来源期刊: 大连医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: miR-429 CRKL 负性调控
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 198-204
• 页数: 7页
• 分类号: Q291
• 字数: 4611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11724/jdmu.2018.03.02

摘要

目的 探讨miR-429对CRKL的靶向调控作用.方法 构建双荧光素野生型psiCHECK-2-CRKL-3'-UTR-WT及突变型psiCHECK-2-CRKL-3'-UTR-MUT重组表达载体,双荧光素酶报告实验检测miR-429与CRKL-3'-UTR的靶向结合;瞬时转染miR-429模拟物及其抑制剂,qRT-PCR和Westernblot检测miR-429对内源性CRKL表达水平变化的影响;qRT-PCR检测CRKL上、下调对内源性miR-429表达水平变化的影响.结果 双荧光素报告实验结果表明miR-429直接靶向CRKL-3'-UTR第2个结合位点;同时与HepG2-miR-NC相比,miR-429上调使内源性CRKL蛋白下调了(55.0±1.5)％(P =0.0089),与HepG2-LNA-miR-429相比,miR-429下调使内源性CRKL蛋白上调了(44.3±1.0)％(P =0.0038),差异具有统计学意义,而miR-429上、下调对内源性CRKL mRNA表达变化无影响;且与HepG2-shNC相比,CRKL下调使内源性miR-429表达上调了(102.8±20.0)％(P =0.0069),与HepG2-PCDH相比,CRKL上调使内源性miR-429表达下调了(92.4±3.2)％(P =0.0009),差异具有统计学意义.结论 miR-429靶向作用于CRKL-3'-UTR在转录后蛋白翻译水平负性调控CRKL表达,同时CRKL负性调控内源性miR-429的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙明忠	大连医科大学生物技术系	27	96	6.0	8.0
2	刘淑清	大连医科大学生物化学与分子生物学教研室	38	105	6.0	8.0
3	郭春梅	大连医科大学生物技术系	15	58	5.0	7.0