流行性乙型脑炎病毒C基因的克隆与表达

• 作者: 何川川 余娜 张雪萍 李有文 童剑军 米丽开姆·托合提尼亚孜
• 来源期刊: 塔里木大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乙脑病毒 C基因 序列分析 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 生理生化研究
• 页码范围: 51-58
• 页数: 8页
• 分类号: S855.3
• 字数: 2892字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0568.2018.04.008

摘要

为深入研究流行性乙型脑炎病毒C蛋白,通过PCR扩增乙脑病毒P3株的C基因,并构建了其融合表达His标签的原核表达载体,测序鉴定并分析了其核苷酸序列特征和氨基酸结构特征.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,并诱导表达了C蛋白,用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.结果成功扩增并构建了C基因的原核表达载体pET-42b-JEV-C,P3株C基因全长381 bp,与参考株同源性为97.64％,推测表达约13 kDa蛋白,预测的二级结构以中间大量的a-螺旋和两侧的β-折叠和少量无规卷曲为特点,C蛋白以包涵体的形式表达,大小与理论相符,Western Blot结果证明C蛋白与His标签确实进行了融合表达.结果表明JEV-C基因可以用原核表达系统高效表达,为后期生物学功能研究奠定基础.