流行性乙型脑炎病毒NS4A蛋白基因的克隆及其在大肠埃希菌的表达

• 作者: 冯国和 刘宁 刘沛 王占英 王玉梅 竹上勉
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 流行性乙型脑炎病毒 pNS4A DNA测序 限制性内切酶分析 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 497-499
• 页数: 3页
• 分类号: R512.32
• 字数: 1935字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2005.06.001

摘要

目的:克隆及表达流行性乙型脑炎病毒(JEV)NS4A蛋白基因.方法:JEV JaGAr-01株感染C6/36细胞,RT-PCR法获取JEV NS4A蛋白基因并采用ABI PRSMTM310 Genetic Analyzer进行DNA测序分析,PCR克隆方法将RT-PCR产物构建于原核表达载体PET-3a的BamHI与EcoRI酶切位点并命名为pNS4A,电泳进行限制性内切酶分析.结果:JEV NS4A蛋白基因大小为446 bp,DNA测序与发表的JEV JaGAr-01株相对应的DNA序列相符合,酶切后从重组质粒释出的插入子与JEV NS4A蛋白基因大小相一致.pNS4A在原核细胞内表达的特异蛋白分子量约16 kDa,与JEV NS4A蛋白理论计算相一致.结论:获取的JEV NS4A蛋白基因来自于JaGAr-01野生株,pNS4A在大肠埃希菌中表达的蛋白产物为JEV NS4A蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘沛	中国医科大学附属第二医院感染科	188	1110	17.0	26.0
2	王占英	中国医科大学附属第二医院感染科	18	47	3.0	6.0
3	刘宁	中国医科大学附属第二医院感染科	38	147	7.0	10.0
4	王玉梅	中国医科大学附属第二医院感染科	49	373	11.0	18.0
5	冯国和	中国医科大学附属第二医院感染科	88	426	12.0	16.0
6	竹上勉	日本金泽医科大学综合医学研究所	2	1	1.0	1.0