甲基强的松龙对光气吸入性肺损伤大鼠NLRP3炎症小体的影响

• 作者: 何岱昆 卲义如 周芳庆 申捷
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: NLRP3炎症小体 光气 急性肺损伤 炎症反应 甲基强的松龙
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 573-579
• 页数: 7页
• 字数: 6178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2018.08.003

摘要

目的 探讨甲基强的松龙(MP)对光气吸入性急性肺损伤中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体及其下游炎症因子的影响.方法 将40只大鼠随机分为4组,空气对照组(吸入与光气染毒组同等流量的空气)、光气染毒组(吸入8.33 mg/L纯度为100％的光气5 min)、生理盐水对照组(吸入同等剂量的光气1h后尾静脉注入2 mg/kg生理盐水)、MP干预组(吸入同等剂量的光气1h后尾静脉注入2 mg/kg甲基强的松龙),每组10只.不同处理后6h收集血清,支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织.制作肺组织石蜡切片,HE染色观察形态学改变,免疫组化检测肺组织中NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平.蛋白质免疫印迹试验(Western blot)技术和RT-PCR方法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)mRNA和蛋白的表达.采用双抗体夹心酶标免疫分析法(ELISA法)测定各组血清和BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-18和IL-33水平.结果 染毒6h后HE染色形态学观察可见,光气染毒组肺组织中有大量炎性细胞浸润.免疫组化染色结果显示,光气染毒组大鼠肺泡间隔增厚,肺组织中可见较多NLRP3、ASC和caspase-1阳性细胞;MP干预组肺组织中有炎性细胞浸润较光气染毒组明显减少,同时NLRP3和caspase-1阳性细胞较光气染毒组减少,而ASC阳性细胞无明显减少.与空气对照组比较,光气染毒组肺组织中NLRP3、ASC和caspase-1mRNA和蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与光气染毒组比较,MP干预组NLRP3和caspase-1 mRNA和蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),而ASC mRNA和蛋白表达量无明显减少.与空气对照组比较,光气染毒组血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33蛋白含量明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);与光气染毒组比较,MP干预组血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33蛋白含量明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MP可通过抑制NLRP3炎症小体的表达进而减少其介导的IL-1β等炎症因子释放来有效地保护大鼠光气吸入性急性肺损伤.