三重靶向介导的Smac过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡和周期进程的影响

• 作者: 刘威武 刘扬 梁硕 王志成 齐亚莉 龚守良
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 乏氧 辐射 第2个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活剂 乳腺肿瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 90-94
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 字数: 3223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20180117

摘要

目的:利用基因重组技术获得三重靶向性Smac过表达的条件复制型腺病毒,探讨其对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡和周期的影响.方法:利用重组技术构建Smac过表达载体pShuttle-Egr1-Smac-HRE-hTERT-E1 A-E1Bp-E1B55K,与骨架载体pAdEasy在BJ5183 (AdEasy-1+)菌中进行重组,获得Smac过表达的条件复制型腺病毒CRAd.pE-Smac,感染MDA-MB-231细胞后,利用化学试剂氯化钴模拟肿瘤细胞乏氧状态,设立对照组、CARd.pE-Smac组、乏氧组和CARd.pE-Smac+乏氧组,并根据是否进行4 Gy照射,每组分为未照射组和照射组,共8个实验组.利用Western blotting法检测各组细胞Smac蛋白的表达,利用流式细胞术检测细胞凋亡率和不同周期进程细胞百分率.结果:Western blotting法检测,经条件复制型腺病毒CRAd.pE-Smac感染、乏氧和照射后,Smac蛋白表达水平增加,CARd.pE-Smac+乏氧+4Gy组Smac蛋白表达水平最高.流式细胞术检测,与对照组比较,CARd.pE-Smac组、乏氧组和CARd.pE-Smac+乏氧组细胞凋亡率均明显升高(P＜0.05或P＜0.01);与相应未照射组比较,4 Gy照射后CARd.pE-Smac+4 Gy组、乏氧+4 Gy组和CARd.pE-Smac+乏氧+4Gy组细胞凋亡率均明显升高(P＜0.05或P＜0.01),CARd.pE-Smac+乏氧+4 Gy组升高最为明显,且S期和G2/M期细胞百分率明显增加(P＜0.05或P＜0.01),与诱导凋亡的结果有相似的趋势.结论:在条件复制型腺病毒CRAd.pE-Smac感染MDA-MB-231细胞、并经乏氧和辐射处理后,实现了三重靶向介导的Smac过表达,其具有促进肿瘤细胞凋亡和诱导G2/M期细胞阻滞的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚守良	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	138	848	15.0	21.0
2	刘扬	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	54	289	10.0	14.0
3	王志成	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	64	216	8.0	11.0
4	齐亚莉	北华大学公共卫生学院	20	70	5.0	7.0
6	梁硕	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	27	83	5.0	8.0