重组肠道病毒71型疫苗(汉逊酵母)抗原含量测定方法的建立

• 作者: 刘建凯 姚昕 张改梅 李国顺 毛群颖 郑海发 陈磊 顾美荣 高帆
• 来源期刊: 中国病毒病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型(EV-A71) 疫苗 汉逊酵母 抗原含量 方法建立
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 476-480
• 页数: 5页
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16505/j.2095-0136.2018.0104

摘要

目的 建立重组肠道病毒71型疫苗(EV-A71)(汉逊酵母)抗原含量测定方法,用于重组EV-A71(汉逊酵母)疫苗的质量控制.方法 以抗EV-A71(汉逊酵母)多克隆抗体为包被抗体,经辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的抗EV-A71单克隆抗体为检测抗体,建立双抗体夹心酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),确定定量限度及最佳定量范围,并对该方法的准确度、精密度和特异性进行方法学验证.结果 线性范围为5～80 U/ml,线性和平行性良好.定量下限为5 U/ml,检测不同浓度的EV-A71国家抗原标准品,回收率在88％～115％,准确度良好;重复性和中间精密度测定,其变异系数均小于15％;与重组柯萨奇病毒A16、甲型肝炎灭活疫苗(HAV)、冻干水痘减毒活疫苗(VZV)、Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)、五价口服轮状病毒减毒活疫苗(RV)等疫苗、Tris缓冲液、PBS缓冲液、破碎液、汉逊酵母宿主蛋白(HCP)均无交叉反应,其专属性良好.结论 建立了重组EV-A71疫苗(汉逊酵母)抗原含量测定方法并进行了初步验证,为疫苗研制中抗原含量的质控提供了可靠的检测手段.