水稻纹枯病菌RsPhm基因的克隆及其表达分析

• 作者: 周而勋 江绍锋 王陈骄子 舒灿伟
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻纹枯病菌 苯酚2-单加氧酶基因 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 111-118
• 页数: 8页
• 分类号: Q785|S435.111.4+2
• 字数: 5638字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16819/j.1001-7216.2018.7094

摘要

[目的]为了阐明苯酚2-单加氧酶基因(RsPhm)在水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani AG-1ⅠA)黑化中的功能,[方法]采用常规PCR和RT-PCR技术对该基因进行克隆和生物信息学分析,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测在儿茶酚胁迫下该基因的相对表达量.[结果]生物信息学分析结果表明,RsPhm基因的DNA和cDNA全长序列分别为2628 bp和1983 bp,编码660个氨基酸.系统进化树分析显示,RsPhm基因在立枯丝核菌(R.solani)不同融合群中具有较近的亲缘关系,在不同真菌之间在进化上具有一定保守性.通过 qRT-PCR 技术分析了在不同浓度儿茶酚胁迫下水稻纹枯病菌RsPhm基因的转录表达情况.外源儿茶酚能提高RsPhm基因的表达量,在12.5 μg/mL浓度下表达量最高,极显著上调35.7倍,在25 μg/mL和50 μg/mL浓度下表达量分别上调19.1倍和28.4倍,但在100μg/mL浓度下表达量仅上调2.1倍.[结论]获得了RsPhm 基因全长序列,了解了其基本生物学信息,明确了其在儿茶酚胁迫下的表达模式.研究结果为科学、系统地阐明水稻纹枯病菌RsPhm基因调控黑色素形成机制奠定了理论基础.