咖啡因联合电离辐射对沉默Chk-1肝癌干细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

• 作者: 于雷 王志成 王铁君
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 咖啡因 X射线 肝肿瘤 肿瘤干细胞 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 52-57
• 页数: 6页
• 分类号: Q345|R735.7
• 字数: 3978字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20180110

摘要

目的:利用咖啡因联合X射线照射处理沉默检查点激酶1 (Chk-1)的肝癌干细胞,通过检测细胞增殖、周期和凋亡,探讨二者对肝癌干细胞的协同杀伤效应.方法:沉默Chk-1的慢病毒载体转染293T细胞,慢病毒感染肝癌HepG2细胞后,Western blotting检测Chk-1蛋白表达,确定沉默效果,同时设非靶对照,分别命名为HepG2-Chk-1和HepG2-control.利用悬浮培养法获得CD133高表达的肝癌干细胞,命名为S-HepG2-Chk-1和S-HepG2-control,分为对照组、咖啡因组、4 Gy组和咖啡因+4Gy组,咖啡因作用后给予4GyX射线照射,分别利用MTT法检测细胞增殖活性,利用PI单染和Annexin Ⅴ-FITC双染流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡率.结果:Western blotting法检测,慢病毒感染HepG2细胞后Chk-1蛋白表达明显降低,而非靶对照组则无明显变化,表明成功获得沉默Chk-1的HepG2细胞模型HepG2-Chk-1和非靶对照模型HepG2-control.将HepG2-Chk-1和HepG2-control细胞悬浮培养后,细胞内的CD133蛋白表达水平均升高,表明存在高比例的CD133+细胞,即肝癌干细胞.与对照组比较,咖啡因组和4 Gy组细胞增殖活性明显降低(P＜0.05或P＜0.01),G1/M期细胞百分率和凋亡率明显升高(P＜0.05或P＜0.01),且咖啡因组S期细胞百分率明显升高(P＜0.05),4 Gy组G0/G1期细胞百分率明显升高(P＜0.05或P＜0.01),咖啡因+4 Gy组协同作用更强.与S-HepG2-control细胞比较,咖啡因组和4 Gy组S-HepG2-Chk-1细胞增殖活性明显降低(P＜0.05或P＜0.01),细胞凋亡率明显升高(P＜0.05或P＜0.01),且G1/M期细胞百分率明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:成功获得沉默Chk-1且CD133+的肝癌干细胞,咖啡因和X射线照射均能抑制细胞增殖和诱导凋亡,并增强G2/M期阻滞,且二者具有协同增强作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于雷	吉林大学第二医院放疗科	67	224	8.0	12.0
2	王志成	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室	64	216	8.0	11.0
3	王铁君	吉林大学第二医院放疗科	69	399	11.0	16.0