基于环介导等温扩增技术快速诊断由Fusarium andiyazi引起的水稻恶苗病

• 作者: 叶文武 戎振洋 曾丹丹 杨红福 袁咏天 郑小波
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻恶苗病 Fusarium andiyazi 环介导等温扩增技术 TAT
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 实验方法
• 页码范围: 256-262
• 页数: 7页
• 分类号: S432.44
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000128

摘要

水稻恶苗病是水稻上的重要病害,在我国各水稻主要种植区均有发生,造成水稻产量的严重损失.Fusarium andiyazi 是近年来国外报道的水稻恶苗病的病原菌之一,本研究基于环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP),以F.andiyazi的TAT(trichothecene 3-O-acetyltransferase)基因为靶标设计并筛选出一套灵敏、特异的LAMP引物,建立了可快速诊断该病菌所引起的水稻恶苗病的LAMP检测技术.在等温条件下(64℃)只需进行核酸扩增反应80 min,反应前向体系中加入了金属离子指示剂HNB(羟基萘酚蓝),反应后即可肉眼观察反应产物颜色变化判断检测结果,阳性反应呈天蓝色,阴性呈紫色.该TAT-Fan-LAMP技术的最低检测灵敏度为100 pg·μL-1.应用该技术成功地对南京江宁和镇江句容田间采集的由F.andiyazi引起的水稻恶苗病进行快速诊断.该LAMP检测技术的建立为F.andiyazi引起的水稻恶苗病的诊断提供了简便快速的新技术.