豫北猪圆环病毒2型的分离及全基因序列分析

• 作者: 周玲玲 宋玉伟 张慢 张明亮 王英杰 连凯琪
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 分离 基因组 序列分析 基因扩增 同源性
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 20-22,250
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+9.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.02.0260

摘要

为了掌握豫北猪圆环病毒2型(PCV-2)的流行毒株,试验采用PCR技术初步鉴定一例疑似PCV-2感染猪的病粒,处理研磨样品并接种到PK-15细胞上分离PCV-2毒株,采用间接免疫荧光技术进一步确诊该病例,通过特异性引物以PCR技术从感染PK-15细胞中扩增该毒株的全基因片段,然后克隆到pMD20-T载体,对PCR鉴定阳性质粒进行测序和分析.结果表明:成功鉴定、分离出一株豫北猪PCV-2毒株,将此分离株命名为PCV-2-HNAY2017;间接免疫荧光试验再次确证该毒株为PCV-2G毒株;阳性克隆基因测序显示其全基因组长为1767 bp;遗传进化树证实PCV-2-HNAY2017与河南南阳毒株(GU938302.1 HNNY0912-PCV-2)的核苷酸同源性最高(99.7％),与KX929000.1 GX230-PCV-2关系较远(94.5％),且与猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒3型(PCV-3)属于不同分支.说明该分离株为PCV-2,与已公布的序列存在一定基因变异.