蛇床子素通过上调微RNA-101a-3p抑制阿尔茨海默病细胞淀粉样前体蛋白表达

• 作者: 倪颖男 吴雨桐 姚璎珈 孔亮 时悦 杨静娴 梁喜才 肖洪贺 蔺莹
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 阿尔茨海默病 蛇床子素/药理学 微RNAs 淀粉样β蛋白前体 蛋白质阵列分析 芯片分析技术
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 神经药理学
• 页码范围: 473-479
• 页数: 7页
• 分类号: R742
• 字数: 4223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2018.10.05

摘要

目的:研究阿尔茨海默病细胞模型中蛇床子素抑制淀粉样前体蛋白(APP)的作用及机制.方法:脂质体2000转染建立APP高表达的SH-SY5Y细胞模型.利用MTT和乳酸脱氢酶(LDH)法检测蛇床子素对APP高表达细胞的存活率和损伤程度的影响.利用基因芯片技术筛选给予蛇床子素治疗后差异表达的微RNA(miRNA),然后通过生物信息学分析预测与差异表达miRNA靶向结合的基因.细胞内转入差异表达miRNA的抑制剂,然后采用免疫荧光细胞化学法观察细胞中APP、β淀粉样蛋白(Aβ)表达情况,RT-PCR法检测细胞中APP mRNA表达.结果:实验成功构建了APP高表达的阿尔茨海默病细胞模型.MTT和LDH法检测结果显示,蛇床子素对于APP高表达的细胞具有一定的保护作用,可以减轻细胞的损伤.miRNA-101a-3p是蛇床子素调控较明显的miRNA,其与APP的3'非翻译区靶向结合.与模型对照组比较,miR-101a-3p抑制剂组APP和Aβ蛋白荧光强度增加,APP mRNA表达量增加(均P<0.01);加入蛇床子素后细胞中APP和Aβ蛋白荧光强度降低,APP mRNA表达量减少(均P<0.01).结论:在阿尔茨海默病细胞模型中,蛇床子素通过上调miR-101a-3p抑制APP表达.