基于miR-33a调控ABCA1表达探讨血管软化丸抗动脉粥样硬化的作用机制

• 作者: 任锟 卢永保 张志鑫 李彦杰 秦合伟 邢若星
• 来源期刊: 中医药信息
• 学科: 医学
• 关键词: 血管软化丸 miR-33a ABCA1 巨噬细胞 脂质代谢
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5
• 字数: 6988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19656/j.cnki.1002-2406.180165

摘要

目的:通过观察血管软化丸是否通过调控miR-33a,进而影响下游信号ABCA1的表达,促进巨噬细胞内胆固醇流出,研究血管软化丸抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:通过病理学检测观察血管软化丸对动脉粥样硬化的影响,通过体外实验建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞,然后用血管软化丸含药血清处理,Real-Time PCR技术检测细胞miR-33a表达.细胞随机分为空白对照组、血管软化丸含药血清处理组、血管软化丸含药血清+miR-33a mimic处理组,RT-PCR和Western blotting法检测细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达,油红O染色和高效液相色谱法检测细胞内脂质含量,[3H]法检测细胞内胆固醇流出.结果:体内实验显示,各中药组血管各层结构正常,排列整齐,局部有小灶性的钙化颗粒物沉积,病变轻,斑块小,泡沫细胞和脂质减少,弹力板基本完整,病变程度明显低于空白对照组.与空白对照组相比,血管软化丸高、中、低三个剂量组小鼠主动脉的miR-33 a表达量降低、ABCA1基因和蛋白相对表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05).体外实验显示,在不影响细胞活性状况下,血管软化丸含药血清呈浓度和时间依赖性下调miRNA33a表达;血管软化丸含药血清能明显上调ABCA1 mRNA和蛋白的表达,但能被转染miRNA33 mimic抑制;血管软化丸含药血清可减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞中的脂质蓄积,但能被细胞中转染miRNA33 mimic所弱化;EGCG减少细胞内胆固醇蓄积是与其促进细胞内胆固醇流出有关,细胞中转入过量miRNA33 a可以抑制胆固醇流出.结论:血管软化丸可通过减少miRNA33 a的生成,进而上调ABCA1表达,促进巨噬细胞中胆固醇流出,这可能是血管软化丸抗动脉粥样硬化作用的分子机制之一.