油酸诱导斑马鱼肝脏细胞脂滴形成与降解模型的建立

• 作者: 丁倩雯 冉超 周志刚 张震 杜震宇
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 农学
• 关键词: 油酸 脂滴 肝细胞 斑马鱼
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 海洋农业 淡水渔业
• 页码范围: 129-138
• 页数: 10页
• 分类号: S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.13304/j.nykjdb.2017.0198

摘要

为建立斑马鱼肝脏细胞脂滴形成与降解模型,采用不同浓度油酸孵育肝细胞,通过Alarmablue法及流式细胞术检测油酸对肝细胞存活率、凋亡率的影响,确定最佳油酸浓度,随后用该浓度油酸处理肝细胞72 h,72 h后去除培养基中油酸继续培养观察.采用油红染色法确定脂质蓄积情况,BODIPY/HOECHST染色法观察不同大小脂滴蓄积率,实时定量PCR检测脂滴相关蛋白的转录调控.结果显示,100 μmol/L油酸为最佳浓度;与0h相比,处理6h小脂滴蓄积率达最大值,48 h大脂滴蓄积率达最大值,72 h超大脂滴蓄积率达最大值;相较于0h,100 μmol/L油酸孵育6～72 h,二酰甘油转移酶基因DGAT2 mRNA水平显著升高;去除油酸24h,脂肪细胞分化蛋白ADRP的mRNA水平显著上调;油酸孵育6h,脂肪积累诱导跨膜蛋白基因FIT1 mRNA表达水平显著上升;油酸孵育6～72 h以及去除油酸24 h CIDE蛋白家族成员CIDEb mRNA表达均显著升高.由研究可知,油酸诱导斑马鱼肝脏细胞建立脂滴形成与降解模型,可较好的模拟鱼类肝脏脂滴蓄积与降解过程,为研究鱼类肝脏中的脂滴蓄积和降解过程中脂滴蛋白的功能提供了模型基础.